Alver A. (Yürütücü), Sağlam N., Şahin E., Doğramacı Ş.
Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2021 - 2023
Metabolik yolaklarda oluşan ve kimyasal olarak aktif moleküllerin fizyolojik dengenin bozulması ile ortamda birikmesi, bazı proteinlerin modifikasyonlarına sebep olmaktadır. Bu şekilde posttranslasyonal modifikasyona uğrayan proteinlerin yapısı, fonksiyonları değişmektedir. Yapısal değişimler proteinlerin yeni bir antijen olarak tanınıp immünolojik süreçlerin başlamasına neden olur. Homosistein (HCY) ve metilglioksal (MGO) proteinlerin posttranslasyonel modifikasyonuna sebep olan aktif bileşikledir ve diyabet, nörodejeneratif hastalıklar gibi birçok hastalıkta vücuttaki seviyelerinin arttığı bilinmektedir. Bu çalışmada, karbondioksitin hidrasyonunu geri dönüşümlü olarak katalizleyen ve geniş bir doku dağılımına sahip olan karbonik anhidraz II enziminin, HCY ve MGO ile modifikasyonlarının enzimin aktivitesi ve antijenik özelliklerinin incelenmesi amaçlanmıştır. Bu amaçla, insan eritrositlerinden afinite kromotografisi ile saflaştırılan CA II in-vitro ortamda homosistein ve metilglioksal ile modifiye edilerek, modifikasyonlar Western Blot ile teyit edilecektir. Enzim hidrataz aktiviteleri Wilbur-Anderson metoduna göre ölçülecektir. Daha sonra Balb-c fareler bu enzimlerle immünize edilerek bu modifikasyonların antijeniteye olan etkileri fare serumlarındaki antikor titreleri ELISA ile ölçülerek belirlenecektir. |