TERMOFİLİK Geobacillus sp. TF16 SUŞUNDAN FİTAZ ENZİMİNİN SAFLAŞTIRILMASI, KARAKTERİZASYONU VE DOĞAL BİR BESİN KAYNAĞINDAKİ FİTATI PARÇALAMA ETKİNLİĞİNİN İNCELENMESİ

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Karadeniz Teknik Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2015

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Emre Dokuzparmak

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışmada endüstriyel önemi olan fitaz enzimi yeni tanımlanmış bir termofilik bakteri türü olan Geobacillus sp. TF16'dan amonyum sülfat çöktürmesi, iyon değişim kromatografisi teknikleri ile 4,93 kat saflaştırıldı. Saflaştırılan enzim SDS-PAGE ile analiz edildiğinde 106,04 kDa molekül ağırlığına sahip tek bir protein bandı tespit edildi. Saflaştırılan enzim sodyum fitat substratı varlığında 85 °C'de pH 4,0'de optimum sıcaklık ve pH'ya sahip olduğu ve optimum pH değerinde enzim 4, 37 ve 85 oC'de 24 saat sonunda aktivitesini yaklaşık olarak %80'nin üzerinde koruduğu tespit edildi. Fitaz enziminin ısıl kararlılığı incelendiğinde, 4 oC'de 24 saat sonunda ve 37 oC ve 85 oC'de 4 saat sonunda aktivitenin büyük oranda korunduğu tespit edildi. Sodyum fitat substratı için enzimin kinetik parametreleri olan Vmaks ve Km değerlerinin sırasıyla 526,28 U/mg ve 1,31 mM olduğu hesaplandı. Metal iyonlarının varlığında enzim aktivitesinin büyük oranda korunduğu, Cu2+ mevcudiyetinde aktivitenin 5 kat arttığı, EDTA mevcudiyetinde ise kısmen azaldığı tespit edildi. Proteaz enzimleri varlığında Geobacillus sp. TF16 fitazının %62 oranında aktivitesini koruduğu saptanmıştır. Geobacillus sp. TF16 fitazının soya sütü fitatını parçalama etkinliği incelenerek 4 saat sonunda fitaz enzimi yaklaşık %20 oranında hidrolizleme yeteneğine sahip olduğu tespit edildi.