Russula delica (Russulaceae)’ dan Polifenol Oksidaz Enziminin Karakterizasyonu
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Karadeniz Teknik Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2009
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: Şaban Keskin
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): NAGİHAN SAĞLAM ERTUNGA
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:?Russula delica (Russulaceae)'dan Polifenol Oksidaz Enziminin Karakterizasyonu? isimli bu çalışmada, yabani ve yenilebilir bir mantar olan Russula delica'dan elde edilen ham özütteki Polifenol Oksidaz (PFO) enzimi spektrofotometrik bir yöntem kullanılarak karakterize edilmiştir. Ham özütün 3,4-dihidroksi fenilalanin (L-DOPA) ile boyanan doğal elektroforezinde Rf değerleri 0,34 (koyu) ve 0,64 (soluk) olan iki bant gözlenmiştir. Ham enzim özütü hem 3-(4-hidroksifenil)-propionikasit (PHPPA) gibi monofenollerin hidroksilasyonunu ve hem de 4-metil katekol (4-MK) gibi difenollerin oksidasyonunu katalizlemiştir. R. delica'dan elde edilen ham özütün hem monofenolaz hem de difenolaz aktivitesi için optimum pH 5,0 olarak bulunmuş ve bu pH'da, 4 ?C'de ve 24 saat sonunda enzimin her iki aktivitesini de % 90 oranında koruduğu gözlenmiştir. Monofenolaz ve difenolaz aktiviteleri için optimum sıcaklığın 30 ?C olduğu ve bu sıcaklıkta 60 dak sonunda enzimin aktivitesini % 90 oranında koruduğu belirlenmiştir. Monofenolaz aktivitesi için PHPPA substratı varlığında Vmaks 769.23 U/mg protein ve Km 0,92mM olarak, difenolaz aktivitesi için ise 4-MK substratı varlığında Vmaks 90 U/mg protein ve Km 0,34 mM olarak belirlenmiştir. Askorbik asit, sodyum metabisülfit, sistein ve benzoik asit kullanılarak yapılan inhibisyon çalışmasında denenen tüm inhibitörlerin R. delica PFO'sunu inhibe ettiği tespit edilmiştir. Bazı metal iyonlarının enzim aktivitesi üzerine etkisi incelendiğinde, enzimin her iki aktivitesinin de metal iyonlarına karşı oldukça duyarlı olduğu gözlendi. Bu veriler ışığında R. delica'dan hazırlanan ham özütteki PFO enziminin genel PFO inhibitörleri ve bazı metal iyonlarına karşı hassas özellikler sergilediği söylenebilir.Anahtar Kelimeler: Polifenol oksidaz, Russula delica, İnhibitör, Monofenolaz, Difenolaz